лабораторне дослідження вивчення властивостей ферментів мета:ознайомитися з дією ферментів на перебіг біохімічних реакцій Обладнання і матеріали: штатив з пробірками, градуйовані піпетки, крапельниці, колба, скляні палички, водяна баня, розчин Люголя, дистильована вода, стакан із льодом, 0,2%-й водяний розчин крохмалю. Теоретичний мінімум Ферменти є біокаталізаторами і мають білкову природу. Виконувати роль каталізаторів ферменти можуть тільки за умови збереження структури, у якій певний фермент активний. Саме у цій структурі фермент утворює фермент-субстратний комплекс. Активність ферменту проявляється лише за певних умов: тих чи інших значень температури, тиску, рН тощо. Ферменти мають певне розташування як у межах окремої клітини, так і в організмі в цілому. Практична частина. Дослід1. Вивчіть дію ферменту слини (амілази) на крохмаль. Хід роботи: 1. Сполосніть ротову порожнину 2-3 рази водою, потім прополощіть 50 мл дистильованої води протягом 3-5 хвилин, потім зберіть утворений розчин слинив колбу. 2. Пронумеруйте дві пробірки й внесіть у них по 2 мл розчину крохмалю. 3. У пробірку №1 додайте 0,5 розчину слини, який містить фермент амілазу, а в пробірку №2 – 0,5 мл дистильованої води. 4. Пробірки №1 і 2 після перемішування витримайте на водяній бані 15 хвилин при температурі +38°С (яка є оптимальною для дії амілази). 5. Додайте до їхнього вмісту 2-3 краплини розчину Люголя та збовтайте до появи синьо-фіолетового забарвлення розчину. 6. У пробірці, де була слина гають знебарвлення розчину внаслідок розщеплення крохмалю ферментом слини амілазою, а де її не було – зберігається синьо-фіолетове забарвлення. 7. Результати дослідів запишіть у зошит. Зробіть висновки. Дослід 2. Дослідіть вплив температури на активність ферменту слини (амілази) у реакції з крохмалем. Хід роботи: 1. Пронумеруйте чотири пробірки й в усі додайте по 2 мл розчину крохмалю і по 0,5 мл розчину слини. 2. Пробірку №1 залиште при кімнатній температурі, №2 – витримайте на водяній бані при температурі +38°С, №3 – кип’ятіть на водяній бані, №4 – поставте в склянку з льодом. 3. Через 10-15 хвилин витягніть пробірки з водяних бань та склянки з льодом. Потім у всі чотири пробірки додайте по 2-3 краплини розчину Люголя. У пробірц гають утворення проміжних продуктів розщеплення крохмалю, які при реакції з йодом жовтий, червоний, або фіолетовий колір; №2 - містить прозорий розчин, що свідчить про повне розщеплення крохмалю амілазою за оптимальної для цього ферменту температури; №3і4 – позитивна реакція на крохмаль (розчини набувають синьо-фіолетового забарвлення), оскільки амілаза стає неактивною внаслідок кип´ятіння чи охолодження. 4. Результати дослідів запишіть у зошит. Зробіть висновки.
